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植物Elisa試劑盒樣品處理和保存關(guān)鍵

更新時間:2018-06-25      瀏覽次數(shù):1735
血清是常用的植物Elisa試劑盒標本之一,ELISA檢測中血漿一般可視為與血清同等的標本,標本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類;外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA測定的血標本的收集、儲存等不妥所形成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過久、標本凝聚 不全和采血管中添加物等影響。
因為植物Elisa試劑盒各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的 ELISA測定中,會導致非特異性顯色,攪擾測定成果。
植物Elisa試劑盒標本受細菌污染 :因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可發(fā)作非特異性顯色而攪擾測定成果。
植物Elisa試劑盒標本保存不妥 :在冰箱中保存過久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、乃至形成檢測OD值偏高;標本凝聚不全;在ELISA檢測中影響血清血漿樣本的要素許多,在考慮試劑要素和操作要素之外,也應從標本要素方面進行剖析。
常見的植物Elisa試劑盒攪擾物質(zhì)有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
植物Elisa試劑盒類風濕因子 :血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)在ELISA檢測中,可與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合,然后導致檢測OD值偏高。補體:ELISA體系中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發(fā)作變構(gòu),其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被露出出來,使C1q 能夠?qū)⒍哌B接起來,然后形成檢測OD值偏高。嗜異性抗體;人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來,也能形成檢測OD值偏高。
此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等,均對ELISA測定成果有攪擾效果。
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植物Elisa試劑盒樣品處理和保存關(guān)鍵:
1、留神防止呈現(xiàn)嚴峻溶血,血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性。
2、植物Elisa試劑盒樣本的收集及血清別離中要盡量防止細菌污染,一則細菌的生長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用,二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性煩擾。
3、血清標本如是以無菌操作別離,則能夠在2——8℃下保存一星期,如為有菌操作,則主張冰凍保存,樣本的長期保存,應在-70℃以下。
4、冰凍保存的血清標本須防止因停電等形成的重復凍融。
5、標本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時,應堆積后取上清檢查。 
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